Sığır ve koyun atıklarında Brucella cinsi mikroorganizmaların bakteriyolojik tanısı

Abstract

Bu çalışmada Bursa ili ve çevresindeki koyun ve sığır atıklarından Brucella cinsi bakterilerin izolasyon ve identifikasyonu yapılarak tür ve biyotip düzeyinde etken tanımlanması amaçlandı. Yenişehir, İnegöl, Gönen, Mustafakemalpaşa, Karacabey, İznik, Manyas, Susurluk ilçeleri ile Bursa merkezden alınan toplam 62 adet koyun ve 41 adet sığıra ait aborte fetus materyali değerlendirildi. İzolasyon amacıyla Kanlı Agar ve Brucella Selektif Agar’a aborte fetüslerin abomasum içeriği ve iç organlarından hazırlanan homojenatlar iokule edildi. Besiyerleri, 37˚ C’de, aerob ve %5 CO2 içeren etüvde 3- 8 gün inkübe edildi. Şüpheli kolonilerin poliklonal A+M Brucella anti-serumlarıyla aglütinasyon özellikleri incelendi. Aglütinasyon gösteren izolatlar Brucella spp. yönünden pozitif olarak değerlendirildi. 23 adet ( % 37.09) koyun ve 8 adet ( % 19.5) de sığırlardan olmak üzere toplam 31 adet (%30) izolat Brucella spp. olarak tanımlandı. İzolatların biyotip düzeyinde identifikasyonları amacıyla akriflavin reaksiyonu, karbondioksit ( CO2 ) gereksinimi, hidrojen sülfür (H2S) oluşturma özelliği, fajlarla lizis, boya ve antibiyotik içeren besiyerlerinde üreme durumu ile A ve M monospesifik anti-serumlarla aglütinasyon özellikleri incelendi. Koyun izolatlarından 5 adet ( % 21.73) B. melitensis biyotip 1, 1 adet (% 4.34) B. melitensis biyotip 2 ve 16 adet ( % 69.56) B. melitensis biyotip 3 identifiye edilirken, bir adet izolat H2 S üretimi nedeniyle atipik B. melitensis olarak değerlendirildi. Sığırlardan elde edilen 8 adet Brucella spp. izolatının 7 adedi (% 87.5) B. abortus biyotip 3 ve 1 adedi (% 12.5) de B. melitensis biyotip 3 olarak identifiye edildi. Buna göre Bursa ve çevresinde koyunlarda B. melitensis biyotip 3 ve sığırlarda da B. abortus biyotip 3 ‘ün predominant olduğu tespit edildi. İzolatların hiçbirinin B. melitensis Rev1 veya B. abortus S19 aşı suşu olmadığı ve bölgede aşılamadan kaynaklanan atık olgularının bulunmadığı belirlendi.

The aim of this study was to isolate Brucella and identfy species and biovars from aborted fetuses of cattle and sheep in Bursa province. Sixty two sheep and 41 cattle aborted fetuses were evaluated for this purpose. Abomasum content and homogenates from internal organs of the aborted fetuses were inoculated into Blood Agar and Brucella Selective Agar and incubated at 37 ˚C, in an aerobic environment and 5 % CO2 content in incubator, for 3- 8 days. Agglutination properties of suspect colonies (with A+M Brucella polyclonal antisera) were examined. Isolates showing agglutination properties were considered to be an Brucella spp. A total of 31 Brucella spp., of which 23 ( 37.09 %) are of ovine and 8 ( 19.5 %) of bovine origin was isolated. For the purpose of biovar identification of the isolates acriflavin reaction, CO2 requirement, H2S production, lysis by phages, growth on dyes, agglutination in A+M polyclonal antisera were used. Out of ovine isolates, five (21.73 %), one (4.34 %), and sixteen (69.56 %) were identified as B. melitensis biovar 1, biovar 2, and biovar 3, respectively. However, one isolate showing H2 S positive was diagnosed as atypical B. melitensis. Seven (87. 5 %) of 8 bovine isolates were identified as B. abortus biovar 3 and one (12. 5 %) was B. melitensis biovar 3. According to the findings, B. melitensis biovar 3 in sheep and B. abortus biovar 3 in cattle were found to be the predominant biovars. The isolates were neither B. melitensis Rev 1 nor B. abortus S19 and no abortus case due to Brucella vaccination was observed in the region.