Entomopatojen nematod heterorhabditis bacteriophora HBH hibrit ırkının in vivo ve in vitro üretim sonrası konukçu arama davranışlarının araştırılması

Abstract

Entomopatojen nematodlar, bitki zararlılarıyla mücadelede önemli bir rol oynayan doğaldüşmanlardır. Bu nematodlar, Rhabditida takımı, Steinernematidae ve Heterorhabditidaefamilyalarında yer alan mikroskobik ipliksi solucanlardır. Genellikle toprakta yaşayan ve aktifolarak hareket eden bu nematodlar, kendilerini bir ara konukçu olarak kullanacakları böceklerienfekte etmek amacıyla hareket ederler. Entomopatojen nematodlar, böceklerin vücutlarınındoğal açıklıklarından veya deri yoluyla girdikten sonra böceği enfekte ederler. Bu enfeksiyonsüreci, nematodların taşıdığı simbiyont bakterilerin böcek vücudunda üremesi ve toksinlerinsalınmasıyla gerçekleşir. Bu tez çalışmasında, konukçu arama davranışlarının karşılaştırılmasıamacıyla Heterorhabditis bacteriophora HBH Hibrit ırkının infektif juvenillerin (IJ'ler) üretimi,in vitro ve in vivo olmak üzere iki farklı yöntem kullanılarak gerçekleştirilmiştir. IJ’ler 2 kontrolkolu ve 1 larva kolu olan Y-Olfaktometre düzeneği içerisine 1000 IJ dozunda orta noktadanuygulanmıştır. Sonrasında bu düzenek 25°C’lik inkübatörde sabit koşullarda bekletilmiştir. 2.gün ve 4. gün sonunda olfaktometre düzeneği açılıp larva koluna ve kontrol kollarına yönelen IJmiktarları belirlenmiştir. Bunun sonucunda in vivo ortamda üretilen IJ’lerde 2. günde larvakoluna yönelimin %52,75 olduğu belirlenmiştir. Bu oran in vivo 4. günde %30,63 olarakbulunmuştur. In vitro ortamda üretilen IJ’lerde 2. günde larva koluna yönelime bakıldığın larvakoluna yönelimin %35,66 olduğu görülmüştür. Bu oran in vitro 4. gün için %46,59 olarakbelirlenmiştir. Buna ek olarak yapılan çalışma sonucunda konukçu ölüm oranı en fazla in vivo 4.günde görülmüştür. Konukçu disekte edildiğinde en fazla IJ miktarı in vivo 4. gündebulunmuştur. Sonuç olarak in vivo üretimle elde edilen IJ’lerin konukçu arama davranışlarınınin vitro üretim ile elde edilen IJ’lere göre konukçuya yönelimlerinin kısa sürede daha yüksekolduğu ortaya çıkmıştır.

Entomopathogenic nematodes (EPN) play a significant role in the biological control of plantpests. These nematodes belong to the orders Rhabditida, families Steinernematidae andHeterorhabditidae, and they are microscopic thread-like worms. They typically reside in the soiland actively move around to seek insect hosts for their survival. Entomopathogenic nematodesenter the insect's body through natural openings or via the integument, infecting their internalorgans. This infection process occurs through the reproduction of bacterial symbionts releasedby the nematodes within the insect's body, accompanied by the secretion of toxins. In this thesisstudy, the production of infective juveniles (IJs) of Heterorhabditis bacteriophora HBH hybridstrain was conducted using two different methods: in vivo and in vitro, with the aim ofcomparing host-seeking behaviors. IJs were applied at a dosage of 1000 IJs from the centralpoint into the Y-Olfactometer device, which consisted of 2 control arms and 1 larva arm.Subsequently, the apparatus was kept under constant conditions in an incubator at 25°C. On the2nd and 4th days, the number of IJs attracted to the larva arm and control arms was determined byopening the olfactometer arms. As a result, the larva arm attraction on the 2nd day wasdetermined to be 52.75% in vivo, while on the 4th day, it was 30.63% in vivo. In vitro, the larvaarm attraction on the 2nd day was found to be 35.66%, and on the 4th day, it was 46.59%.Additionally, the study revealed that the highest host mortality rate was observed on the 4th dayin vivo. Upon dissection of the hosts, the highest number of IJs was found on the 4th day in vivo.Consequently, it was evident that IJs produced through in vivo methods exhibited a higher andquicker host-seeking tendency compared to those produced through in vitro methods.